Цытагенетычны метад вывучэння спадчыннасці

Цитогенетика ўяўляе сабой самастойны раздзел вучэння аб спадчыннасці, у якім даследуюцца розныя, перш за ўсё, назіраныя (эксплицированные) носьбіты, якія змяшчаюць у сабе інфармацыю аб генетычнай спадчыннасці. Такімі носьбітамі выступаюць храмасомы розных тыпаў (политенные, митотические і мейотические), пластыды, интерфазные ядра, і, у меншай ступені - мітахондрыі.

Зыходзячы з гэтага, цытагенетычны метад ўяўляе сабой сукупнасць спосабаў і тэхналогій вывучэння, перш за ўсё, храмасом, падчас якіх устанаўліваецца іх колькасны параметр, праводзіцца іх хіміка-біялагічны апісанне, даследуецца структура і рэжымы паводзінаў падчас клеткавага дзялення. Навуковай задачай дадзенага даследавання з'яўляецца ўстанаўленне сувязі паміж характарам і дынамікай змены структуры храмасом і карцінай, якая адлюстроўвае зменлівасць прыкмет.

Адным з найважнейшых напрамкаў даследаванні, якое прадугледжвае цытагенетычны метад, з'яўляецца правядзенне аналізу карыатыпе чалавека. Дадзенае даследаванне, як правіла, праводзяць на культурах, у якіх адбываецца дзяленне палавых і саматычных клетак.

Самая распаўсюджаная культура для такога роду даследаванняў - клеткі перыферычнай крыві, такія як лімфацыты, фібрабласты і клеткі касцявога мозгу. Самай даступнай культурай, якая выкарыстоўваецца ў медыцынскай цитогенетике, з'яўляюцца лімфацыты крыві. Прычына гэтага складаецца ў тым, што, як правіла, яны з'яўляюцца прадметам аналізу і ў постнатальном перыядзе. Пры аналізе карыатыпе плёну цытагенетычны метад мяркуе выкарыстанне клеткавых культур, выбар якіх абумоўлены шэрагам фактараў. Галоўным з іх з'яўляецца тэрмін цяжарнасці. Напрыклад, пры гэтым тэрміне менш за 12 тыдняў, цытагенетычны аналіз храмасом лепш за ўсё вырабляць з удзелам клетак хоріона, а пры тэрмінах цяжарнасці больш за 12 тыдняў, мэтазгодна для даследавання разглядаць клеткі самога плёну. Для гэтай мэты яны спецыяльна выдзяляюцца з плацэнты і крыві плёну.

Для ўстанаўлення карыатыпе цытагенетычны метад вывучэння спадчыннасці патрабуе атрымання ўзору крыві ў колькасці не меней 1-2 мл. Пры гэтым сам метад мяркуе вядзенне даследаванні, які складаецца з трох асноўных этапаў:

- вылучэнне і культываванне клетак, на якіх будзе ажыццяўляцца аналіз;

- афарбоўка прэпарата;

- правядзенне стараннага аналізу прэпарата пад мікраскопам.

Эфектыўным цытагенетычны метад генетыкі можа быць толькі тады, калі будуць выкананыя наступныя ўмовы. Па-першае, павінна быць пэўная колькасць клетак, якія знаходзяцца ў метафазной стадыі. Па-другое, культываванне павінна праводзіцца ў строгай адпаведнасці з усталяванымі правіламі і на працягу перыяду не менш за 72 гадзін. Па-трэцяе, фіксацыя клетак павінна рабіцца растворам воцатнай кіслаты і метанолу ў строгай суадносінах гэтых рэчываў 3: 1.

На этапе афарбоўкі прэпарата для цытагенетычных вывучэння выбар кветак вырабляецца з улікам самой мэты даследавання, то ёсць, які тып перабудоў неабходна вывучыць. Часцей за ўсё, выкарыстоўваюць метад суцэльнага афарбоўвання, так як ён найбольш просты для вызначэння колькаснага параметру храмасом. Сучасныя даследаванні больш за ўсё ўжываюць дадзены метад афарбоўвання для вызначэння анамалій карыатыпе ў іх колькасным выразе. Але такі цытагенетычны метад не дае магчымасці вызначыць і выявіць структурную дынаміку храмасом. Таму ўжываюць іншыя, спецыяльныя метады, якія дазваляюць нівеліраваць дадзены недахоп метаду суцэльнага афарбоўвання. Найбольш распаўсюджаныя з іх, такія як метад дыферэнцыраванай афарбоўкі, G-метад, R-метад і іншыя.

І, нарэшце, трэці этап даследавання складаецца ў мікраскапічным вывучэнні афарбаваных храмасом, якія знаходзяцца ў метафазной стадыі. У ходзе яго ўсталёўваецца колькасць нармальных і анамальных па сваім стане клетак арганізма плёну чалавека. Для гэтага, як правіла, праводзіцца аналіз некалькіх тканін.