Флюарэсцэнтная мікраскапія: асаблівасці даследаванні

Тэрмін "мікраскапія" мае грэцкія карані. У перакладзе ён азначае даследаванне аб'ектаў з ужываннем высокадакладных прыбораў. . У апошні час усё больш папулярнымі сталі флюарэсцэнтная і электронная мікраскапія.

адрознівальная здольнасць

Пад ёй, як правіла, разумеюць мінімальную адлегласць, на якім могуць знаходзіцца выразна адрозныя аб'екты. Ад магчымай здольнасці абсталявання будзе залежаць ступень пранікнення ў мікраскапічны свет, магчымасць разгледзець памер доследнага элемента. Пры вялікім павелічэнні межы аб'ектаў могуць злівацца. Адпаведна, існуюць пэўныя межы, далей якіх набліжэнне элементаў бессэнсоўна.

Метад люмінесцэнтнай мікраскапіі: механізм

Пры ператварэнні энергіі, якую паглынае рэчыва, у бачнае выпраменьванне адбываецца свячэнне. Яго называюць люмінесцэнцыі. Гэта з'ява звязана з тым, што некаторыя рэчывы пад уздзеяннем святла пачынаюць выпускаць прамяні з іншай (як правіла, вялікі) даўжынёй хвалі. Акрамя гэтага, некаторыя аб'екты, якія маюць пры нармальным асвятленні пэўны колер, пад уплывам ультрафіялету змяняюць сваю афарбоўку.

спецыфіка

Аб'ект, які нельга ўбачыць у ўльтрафіялетавым святле, можа выпраменьваць яркі бляск, калі яго апрацаваць спецыяльным рэчывам. У ім элементы свецяцца розным колерам у цемры. Сіла выпраменьвання розная, але, як правіла, яна невялікая. У гэтай сувязі флюарэсцэнтная мікраскапія эфектыўная ў цёмным памяшканні. Пры выкарыстанні гэтага віду даследаванні аб'ект праглядаецца ў святле, які ён сам і выпраменьвае. Хімічны склад тканін, клетак будзе ўплываць на якасць вывучэння. Флюарэсцэнтная мікраскапія лічыцца ў пэўнай ступені гистохимическим даследаваннем.

класіфікацыя

может быть первичной или вторичной. Флюарэсцэнтная мікраскапія можа быць першаснай або другаснай. У апошнім выпадку аб'ект апрацоўваецца адмысловымі злучэннямі, якія даюць свячэнне. основывается на собственной способности исследуемого элемента излучать свет. Першасная флюарэсцэнтная мікраскапія грунтуецца на ўласнай здольнасці доследнага элемента выпраменьваць святло.

абсталяванне

Флюарэсцэнтная мікраскапія выконваецца з ужываннем самых розных прылад. У якасці асноўнага іх элемента выступае асвятляльнік. Ён абсталёўваецца лямпай ультрафіялетавага выпраменьвання. Акрамя гэтага, у прыладах выкарыстоўваецца набор фільтраў. У некаторых прыборах іх даволі шмат рознай канфігурацыі. У залежнасці ад таго, які колер ужываецца для распачынання люмінесцэнцыі - ультрафіялетавае або сіні, паміж крыніцай святла і доследным аб'ектам змяшчаюць адпаведны фільтр. Паколькі свячэнне мікраскапічнага элемента энергетычна слабым узбуджальнага святла, яно будзе ўлоўліваць толькі пры адной умове. Лішак прамянёў, якія адыходзяць ад крыніцы, павінна быць адцяты жоўта-зялёным фільтрам. Ён размяшчаецца на акуляры прыбора. Найбольш выяўленым эфект люмінесцэнцыі будзе тады, калі фільтр цалкам адсячэ прамяні, якія адыходзяць ад светлавога крыніцы.

З чаго складаецца ўстаноўка ў бачным выпраменьванні? У ёй прысутнічае яркі светлавой крыніца і біялагічны мікраскоп. Паміж люстэркам прыбора і лямпай усталёўваюць сіне-фіялетавы фільтр. Гэта можа быць ФС-1, УФС-3 і гэтак далей. Жоўты фільтр апранаецца на акуляр мікраскопа. З іх дапамогай на аб'ект падае сіне-фіялетавы святло. Ён і ўзбуджае люмінесцэнцыю. Але гэтае святло можа перашкаджаць ўбачыць свячэнне. Таму на шляху да вока ён адсякаецца жоўтым фільтрам. Ўстаноўка асвятлення вырабляецца па метадзе Келера, з адным выключэннем. Дыяфрагму кандэнсара неабходна цалкам адкрыць. Пры даследаванні важна выкарыстоўваць нефлуоресцирующее иммерсионное алей. Для зніжэння ўласнай святлення да яго дадаюць нітрабензолу (2-10 кропель / 1 г).

Флюарэсцэнтная мікраскапія: прымяненне ў мікрабіялогіі

Перавагамі гэтага віду даследавання з'яўляюцца:

1. Магчымасць атрымання каляровых малюнкаў.
2. Высокі ўзровень кантраснасці самоизлучающих элементаў на чорным фоне.
3. Выяўленне і вызначэнне лакалізацыі асобных відаў вірусаў і мікробаў.
4. Магчымасць вывучэння празрыстых і непразрыстых жывых арганізмаў.
5. Вывучэнне жыццёвых працэсаў у іх дынаміцы.

Неабходна таксама сказаць, што флюарэсцэнтная мікраскапія спрыяе развіццю найтонкіх метадаў гисто- і цитохимии, экспрэс-дыягностыкі.